2018年8月10日，美國FDA宣布批準Onpattro（Patisiran），是批準的首款siRNA藥物及首個非病毒給藥系統的基因治療藥物。RNAi療法的上市，是諾貝爾獎成果從概念走向實際治療用途的一個光輝里程碑。本文主要就Onpattro的臨床前安全性評價展開概述，為國內外正在研究的siRNA藥物臨床前安評提供參考。

siRNA簡介

RNA藥物旨在通過基因的表達、沉默等功能治療疾病，基因治療被業界認為是繼化學小分子藥物、生物大分子藥物之后的第三代治療藥物。目前，RNA藥物主要可分為四大類，即miRNA, siRNA，ASO，核酸適配體。由于siRNA藥物療效較好、技術取得突破，目前最受關注，siRNA目前是RNA藥物中最主要的一類。

小干擾RNA（Small interfering RNA；siRNA），是一類雙鏈RNA分子，長度為20-25個堿基對。它的作用機制是：長鏈雙RNA（double-stranded RNA，dsRNA）被剪切為siRNA后，與蛋白質結合形成siRNA誘導干擾復合體(siRNA induced interference complex, RISC)，RISC再與靶基因的mRNA,結合，使mRNA降解,并最終靜默特定基因表達。

Onpattro (Patisiran)基本信息

Onpattro適應癥為遺傳性轉甲狀腺素蛋白淀粉樣變性（hATTR）引起的周圍多發性神經疾病，機制為沉默hATTR mRNA的表達，減少產生hTTR蛋白，逐漸減少周圍神經中淀粉樣沉積物（hTTR）的積累，最終達到治療疾病的目的。臨床給藥途徑為靜脈輸注，每3周1次。siRNA分子的分子量約為14kD，具有生物大分子結構特性。

載體導入技術是siRNA藥物的制劑難點。Onpattro是一種脂質復合物注射液，將siRNA包裹在脂質納米顆粒（LNP）中，靜脈輸注后藥物直接遞送至肝臟細胞內。Onpattro曾獲得美國FDA授予的突破性療法認定、優先審評資格、快速通道資格和孤兒藥資格。

Onpattro 臨床前安評

PK試驗。體內分別做了ADME試驗：大鼠和食蟹猴單次PK試驗，放射性標記的大鼠和食蟹猴組織分布，大鼠代謝產物鑒定、大鼠排泄物質平衡。體外試驗有：血漿蛋白結合，體外代謝產物鑒定、CYP誘導、CYP抑制、轉運體抑制實驗。

一般毒理。種屬的選擇是大鼠和猴。給藥途徑與臨床一致，都是靜脈輸注。給藥頻率，臨床上是每3周給藥一次。分別開展了大鼠和猴6周每2周給藥1次（總計4次）并伴隨60天恢復期的毒理和毒代試驗。由于Onpattro是一種脂質納米微粒(LNP)復合物注射液，在大鼠和猴毒理試驗中分別設置1組AF-011-1955（含有抗熒光素酶的siRNA，整合在了LNP）考查期毒性。在大鼠試驗中，在所有給藥組發現肝臟組織病理學變化，沒有找到NOAEL（懷疑是LNP介導的毒性），所以開展了大鼠Patisiran 4周毒理試驗，每4周給藥一次，總計2次。在該試驗中所有給藥組又發現肝臟組織病理學變化，用LD（半數致死量）作為NOAEL。在大鼠試驗中，通過增加GLP試驗繼續探索NOAEL，為毒理試驗中未找到NOAEL提供了借鑒。

遺傳毒理。開展了3個經典的遺傳毒理試驗: Ames、染色體致畸變試驗、小鼠體內微核試驗。對于LNP中兩個新的賦形劑，也分別開展了Ames和染色體致畸變試驗。

安全藥理。心血管、呼吸、中樞神經系統整合在一個試驗中考查，種屬選的猴。此外還有體外hERG試驗，不過考查的是LNP對hERG作用。

此外還開展了一些特殊毒理試驗，還包括體外溶血試驗、HPMC細胞因子試驗、小鼠免疫刺激試驗。

Onpattro分子的分子量約為14kD，具有生物大分子結構特性。藥代部分，體內ADME做的很全，體外試驗，將重要的都做了，足夠支持臨床I期?？傮w上，Onpattro臨床前毒理試驗做的非常全面。一般大分子不做遺傳毒理，原因是主要作用于細胞表面或間質，而不會與染色體或DNA作用。然而Onpattro靜脈輸注后藥物直接遞送至肝臟細胞內，所以也考查了遺傳毒理。

展望

說到近些年的熱點，siRNA療法無疑是其中之一。第1個siRNA藥物獲批，對整個領域有巨大的振奮作用。資本回歸RNAi領域，掀起第二次投資熱潮；加上政府、政策鼓勵，RNAi藥物迎來發展機遇。siRNA藥物療效好，技術取得突破，成為當前RNAi類藥物最受關注的一類技術，也將當仁不讓的成為主流的RNAi藥物。通過對首款siRNA藥物Onpattro的臨床前安評概述，為siRNA藥物臨床前方案設計提供一些參考和借鑒。